上海如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢 創(chuàng)新服務 上海東寰生物科技供應

EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復制的DNA分子中，通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性，適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究，尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。與BrdU檢測方法相比，EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU與T非常相似，而EdU染料只有BrdU抗體的1/500，在細胞內(nèi)很容易擴散，無需DNA變性（酸解、熱解、酶解等），可有效避免樣品損傷，而且無需抗原抗體反應，能在細胞和組織水平更準確地反映DNA復制活性~EdU細胞增殖檢測試劑盒的特點是什么？上海東寰告訴您。上海如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢

蛋白抽提/WesternBlotting技術(shù)服務WesternBlotting技術(shù)服務(DH1004)一.服務內(nèi)容1、蛋白提取：從人或動物細胞、組織，細胞等樣品中提取蛋白樣品。2、蛋白定量：對樣品中蛋白進行半定量分析。3、WesternBlot檢測（1）電泳：聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）分離蛋白樣品。（2）濕法轉(zhuǎn)印。（3）雜交：用抗體鑒定膜上的特定蛋白。（4）顯色：ECL熒光顯色，黑條帶白背景照片4、提供蛋白內(nèi)參檢測（所有內(nèi)參抗體均不收取費用）。5、預實驗及正式實驗服務。二.樣品要求1、細胞＞1×10^7；組織＞30mg；細菌濕重＞1mg等。2、樣品蛋白濃度＞1mg/ml，蛋白量＞200ug/樣品。3、建議提供目的蛋白陽性表達樣品（純蛋白、有陽性表達的細胞或組織、商品化的陽性對照產(chǎn)品等）作為陽性對照。注：若有特殊處理的樣品，請盡可能出示相關材料（具有**性的材料除外）。三.收費標準服務項目免疫學檢測服務內(nèi)容周期產(chǎn)物/報告價格（元）DH1004-01樣品準備總蛋白提取、定量、質(zhì)控3天總蛋白質(zhì)控報告100元/樣DH1004-02免疫印跡（WB）WB預實驗，質(zhì)控WB體系5-10天完整實驗報告1000元/膜WB檢測正式實驗10-15天完整實驗報告1000元/膜四、客戶提供材料1、樣品：新鮮或正確保存的樣品以及與樣品相關的必要資料。上海如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢EdU細胞增殖檢測試劑盒應用再哪些地方？

免疫熒光技術(shù)服務免疫熒光技術(shù)服務（DH0014）一、服務介紹免疫熒光技術(shù)（Immunofluorescencetechnique）又稱熒光抗體技術(shù)，是標記免疫技術(shù)中發(fā)展*早的一種。將抗原或抗體用熒光素進行標記，標記的抗原或標記的抗體與相應的抗體或抗原反應后，測定復合物中的熒光素，這種免疫技術(shù)稱為免疫熒光素技術(shù)。免疫熒光細胞化學分直接法、夾心法、間接法和補體法。二、服務內(nèi)容及價格服務編號服務內(nèi)容服務價格服務周期（工作日）DH0014-01免疫熒光單標記檢測咨詢咨詢DH0014-02免疫熒光雙標記檢測咨詢咨詢?nèi)?、客戶提?、細胞株或細胞爬片。注：細胞爬片不宜太密；2、熒光檢測所用的抗體3、實驗前，客戶需告知具體的細胞處理方式及詳細要求。注：若有特殊處理的樣品，請盡可能出示相關材料（具有**性的材料除外）。四、服務流程免疫熒光單標記方法免疫熒光單標記是指只標記一種蛋白質(zhì)分子，方法比較簡單，只要按照染色步驟去做，通常不存在太多的問題。但要注意固定液的選擇，固定液選擇的合適與否，可能會直接影響染色結(jié)果。具體染色方法如下。1、所需材料與試劑a,培養(yǎng)在蓋玻片或玻璃培養(yǎng)皿中融合程度達到60%-70%的細胞。b,一抗、FITC或TRITC標記的二抗。c。

注：1）培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2）孵育時間至少2小時，可延長至24小時后再檢測也可以。4、以1×PBS清洗細胞兩次，每次5分鐘，以除去未摻入RNA的EU殘留。注：貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。細胞的固定和通透1、每孔加入150μl細胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；注：1)該試劑盒配備了細胞固定液，也可以使用含4%多聚甲醛的PBS來進行細胞固定；2)如果使用其他的細胞固定劑建議用DEPC水來配置，避免RNA酶降解細胞內(nèi)的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘；3、棄甘氨酸溶液，每孔加入300μlPBS洗液，室溫清洗5分鐘；4、每孔加入300μlTritonX-100細胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細胞通透溶液；5、每孔加入300μlPBS洗液，室溫清洗5分鐘；EU染色1、通過用10：1去離子水稀釋10×反應緩沖液進行配制1×EU反應緩沖液；2、按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解，即為可用的緩沖添加劑的濃度，建議現(xiàn)用現(xiàn)配；注：緩沖添加劑為白色粉末，較難準確稱量，稱量范圍可稍微放寬，但是不應超過±20%，且該粉末較易氧化，使用后請旋緊管蓋，如試劑出現(xiàn)棕黃色，則需報廢或更換。EdU細胞增殖檢測試劑盒給社會帶來了什么好處？

避免反復凍融。如短時間內(nèi)需多次重復使用，請于4℃避光保存，有效期半年。使用前須知該試劑是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EU后進行細胞涂片處理，固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。實驗準備1、蓋玻片2、1×PBS（）（用DEPC水配置）3、含TritonX-100的PBS（用DEPC水配置）4、甘氨酸溶液(2mg/ml)（用DEPC水配置）5、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿實驗參考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培養(yǎng)基100μl200μl300μl500μl1ml染色反應液100μl200μl300μl500μl1ml實驗步驟(以96孔板，HK2貼壁細胞為例)細胞培養(yǎng)取對數(shù)生長期細胞，以每孔4×103~1×105細胞接種于96孔板中，培養(yǎng)至正常狀態(tài)。EU標記1、將細胞完全培養(yǎng)基中按照500：1的比例加入EU溶液，制成2×EU標記培養(yǎng)基；2、提前將2×EU標記培養(yǎng)基預熱，然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中，獲得1×EU溶液，其中EU的終濃度為500μM；注：1）我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因為這樣可能會影響細胞增殖的速度；2）配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細胞為宜；3、每孔加入300μl含EU培養(yǎng)基孵育細胞2小時，棄培養(yǎng)基。上海EdU細胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展趨勢。上海如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢

上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。上海如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢

本試劑盒包含EdU法檢測所需要的所有組份，同時提供了藍色細胞核染料Hoechst33342，可以用來復染所有細胞核，也可用于細胞周期分析。使用本試劑盒所做結(jié)果可以用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀或熒光酶標儀進行檢測，也可以用于高內(nèi)涵篩選(High-ContentScreening,HCS)。對6孔板培養(yǎng)的細胞（每孔500μl的Click反應液）、96孔板培養(yǎng)的細胞（每孔50μl的Click反應液）、每管細胞數(shù)量為10-100萬的流式細胞儀檢測（每管500μl的Click反應液）以及冰凍或石蠟切片的檢測（每個樣品100-200μl的Click反應液）上海如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢