2025-06-07 00:13:24
HE染色法的話,不能準(zhǔn)確說出細(xì)胞器的顏色,實(shí)驗(yàn)記錄或考試時(shí)只能說染色效果為 :細(xì)胞核藍(lán)色,胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維和紅細(xì)胞呈深淺不一的紅色?;蛘咴敿?xì)說明如下:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染色規(guī)范化流程以及注意事項(xiàng)。吉林質(zhì)量好的HE染色哪家好
HE染色脫蠟不凈的原因及驗(yàn)證方法:1)二甲苯使用過久,含蠟成分太高或脫蠟效果差:可更換二甲苯驗(yàn)證。2)切片經(jīng)烤片,冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低;延長拖拉時(shí)間或用熱的切片脫蠟驗(yàn)證。3)脫蠟時(shí)間太短或振蕩太少,幅度太??;可延長脫蠟時(shí)間或以多振蕩來驗(yàn)證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時(shí)間過久,導(dǎo)致乙醇中二甲苯含量過高,二甲苯殘留在切片上(由于二甲苯與水不相溶,切片上有二甲苯的地方,蘇木精就沒有辦法滲透進(jìn)去,在切片染色完成后留下了點(diǎn)狀的不著**域):更換各道乙醇驗(yàn)證。5)二甲苯、乙醇質(zhì)量不佳(偶有試劑瓶內(nèi)裝的試劑與試劑名不相符):換批號(hào)驗(yàn)證。6)更換脫蠟液體時(shí)試劑拿錯(cuò):需重新配置驗(yàn)證。7)更換脫蠟液體時(shí)試劑次序放錯(cuò):需重新配置驗(yàn)證。8)烤片時(shí)間短,切片上水分沒有烤干,也會(huì)導(dǎo)致著色不勻,出現(xiàn)點(diǎn)狀發(fā)白區(qū)域。吉林質(zhì)量好的HE染色哪家好冰凍組織切片的HE染色。
HE染色標(biāo)本一般是針對石蠟標(biāo)本,脂滴和石蠟都是的有機(jī)物, 都具有非極,脂滴應(yīng)該可以溶解石蠟的。 HE染色就是用蘇木精和伊紅對細(xì)胞內(nèi)的核糖體和細(xì)胞質(zhì)染色的方法。 H:Hematoxylin,蘇木精 E:Eosin,伊紅 蘇木精(Hematoxylin,H)是一種堿染料,可將細(xì)胞核和細(xì)胞內(nèi)核糖體染成藍(lán)紫色,被堿染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜堿。 伊紅(,E)是一種酸染料,能將細(xì)胞質(zhì)染成紅色或淡紅色,被酸染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜酸。染色前,須用二甲苯脫去切片中的石蠟,再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精,***入蒸餾水,就可染色。南京英瀚斯生物
HE染色原理:一、細(xì)胞核染色原理:蘇木精為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外。使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。二、細(xì)胞漿染色原理:細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系,當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時(shí),胞漿對外不顯電性,此時(shí)酸或堿性染料不易染色。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時(shí),大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值,表現(xiàn)酸性電離,而帶負(fù)電荷的陰離子,可被帶正電荷的染料染色,現(xiàn)時(shí)胞核也被染色,核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子),就可被帶負(fù)電荷(陰離子)的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽離子)結(jié)合而使細(xì)胞漿染色,細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織,嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對比HE染色技術(shù)幾種常見的染色問題。
HE染色觀察細(xì)胞凋亡,凋亡檢測中形態(tài)學(xué)方法是**直觀、可靠的方法之一。對組織和各種細(xì)胞進(jìn)行染色后,在光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察,通過觀察細(xì)胞的形態(tài)或染色的類型來判斷凋亡的發(fā)生與否。細(xì)胞涂片或細(xì)胞甩片的制備:對于貼壁細(xì)胞,可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中,讓培養(yǎng)細(xì)胞長于玻片上,然后用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后取出,用4%多聚甲醛固定5min。對于懸浮細(xì)胞,用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后,離心1000r/min收集細(xì)胞,用PBS洗2次,收集調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1X105/ml,涂片或用離心甩片,用4%多聚甲醛固定5min;在光學(xué)顯微鏡下,貼壁細(xì)胞由原來的梭形或多角形變小、變圓,核呈藍(lán)色或藍(lán)黑色,胞漿呈淡紅色,核固縮、破碎,形成凋亡小體等。懸浮細(xì)胞,整個(gè)細(xì)胞皺縮,核固縮,破碎,形成凋亡小體,染色質(zhì)顏色加深等。HE染色中固定液如何配置。吉林質(zhì)量好的HE染色哪家好
HE染色取材和樣本保存方式。吉林質(zhì)量好的HE染色哪家好
HE染色知識(shí)點(diǎn)1:對送檢組織標(biāo)本的要求送檢組織標(biāo)本在手術(shù)切除或活檢后應(yīng)當(dāng)立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定。尸檢標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡量在死亡后盡早取材固定。送檢組織需要全部取材的,應(yīng)當(dāng)在送檢單上注明,有特殊要求(如細(xì)菌培養(yǎng)、解釋道化學(xué)分析等)應(yīng)當(dāng)事先聯(lián)系,并且在標(biāo)本未固定前進(jìn)行處理。知識(shí)點(diǎn)2:組織取材要求在對送檢組織標(biāo)本進(jìn)行詳細(xì)檢查的基礎(chǔ)上,根據(jù)診斷的需要,確定取材的部位和塊數(shù)。切取的組織應(yīng)當(dāng)按照不同的部位分別給予不同的編號(hào)或標(biāo)記,以便鏡檢時(shí)核對。另外,盡可能在取材前對有意義的標(biāo)本的表面及剖面鏡下攝影,并編號(hào)存檔南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。吉林質(zhì)量好的HE染色哪家好